2019年8月13日,国家知识产权局公开了由青岛农业大学李和刚、秦怀远、赵金山、辛京京、张宁和郝小静发明设计的专利--一种CRISPR/Cas基因编辑系统及其制备方法和应用。
该发明提供了一种CRISPR/Cas基因编辑系统及其制备方法和应用,属于基因编辑技术领域,所述CRISPR/Cas基因编辑系统包括pcDNA3.1‑LjCas9质粒和pLjCas9‑sgRNA质粒。所述应用包括以下步骤:确定靶标序列,设计单链寡核苷酸对;退火获得双链DNA片段;连接到pLjCas9‑sgRNA质粒中获得靶标序列sgRNA表达载体;靶标序列sgRNA表达载体与pcDNA3.1‑LjCas9质粒共转染细胞后培养。所述基因编辑系统能够对靶标DNA进行特异性切割,编辑效率高。
附图:
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